베네딕트 반응

Ⅰ. 베네딕트 실험

베네딕트 실험은 약염기성 조건에서 진행되며 매우 민감하여 소량의 시료에 대해서도 적용할 수 있다. 단당류와 잠재적인 알데히드기를 가진 이당류(ex 엿당)는 Cu2+이온(베네딕트 용액에서는 시트르산 음이온과 착물로 존재함), 디니트로살리실산 및 피크르산과 같은 산화제를 쉽게 환원시킨다. 당의 산화된 형태는 아직까지 확실히 알려져있지 않다.

그러나 녹지 않는 Cu2O 침전의 생성은 양성 반응을 판단하는 결정적인 기준이 된다. 침전의 색은 녹색에서 노란색을 거쳐 빨간 벽돌색까지 변하는데 침전의 입자 크기와 가시광선을 흡수하는 차이 때문이다. 이 시험은 환원당에만 적용되는 것은 결코 아니다. 일반적으로 알데히드는 베네딕트 시약을 환원시킨다. 포름산, 히드라조벤젠, 페놀, 페닐히드라진, 피로가롤 및 요산과 같은 화합물들은 이 시약과 반응한다. 이러한 화합물들은 자연에서 채취한 시료에는 한 두 종류가 포함되어 있다.

Ⅱ. 베네딕트 시약의 제조법

① 173g의 시트르산나트륨(Sodium citrate)과 무수 Na2CO3 90g을 600mL의 미지근한 증류수에 함께 녹인다.

② 위의 용액을 거름종이로 걸러준 다음 증류수를 첨가하여 850mL가 되게 한다.

③ 17.3g의 CuSO4․5H2O를 증류수에 녹여 150mL가 되게 한다.

④ ②의 용액을 유리 막대로 저으면서 ③의 용액을 천천히 섞어준다.

Ⅲ. 베네딕트 반응의 활용

⑴ 포도당 및 엿당 검사 과정

① 시험관에 1% 포도당 용액 1mL와 베네딕트 용액 5mL를 넣는다.

② 포도당 대신 증류수 1mL를 사용하여 표준시험관(대조군)을 준비한다.

③ 두 시험관을 끓는 물 중탕에 2～3분간 담근다.

④ 용액의 색을 관찰하고 어느 쪽에서 침전이 생성되는지 관찰한다(용액의 색 변화가 양성 반응을 의미하지는 않으며 침전이 생겨야만 한다).

⑤ 다른 종류의 당 용액을 대상으로 위의 실험을 반복한다. 가열 시간은 정확하게 지킨다.

⑵ 뇨의 정성 시험

건강한 사람은 24시간 동안 오줌을 통해 약 130mg의 포도당을 배설할 뿐이므로 임상에서 정량시험에 쓰이는 방법으로는 정상 오줌 속의 포도당을 확인할 수 없다. 그러므로 보통 검사에서는 당뇨병의 경우에 한해서 포도당이 확인된다. 그러나 건강한 사람일 경우도 식사 직후에는 당뇨가 나타날 수 있다. 베네딕트 반응을 통해 뇨속의 정성적으로 당을 확인할 수 있다.

Ⅳ. 참고 자료

① 생물유기화학실험 ; 손기남, 홍남주 저 ; 미학사

② 실험생화학 ; 한국생화학회 저 ; 탐구당

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